Por qué las bacterias son difíciles de ver
Las bacterias son difíciles de ver con un microscopio compuesto de campo brillante por varias razones:
- Son pequeños: para ver su forma, es necesario utilizar un aumento de aproximadamente 400x a 1000x. La óptica debe ser buena para resolverla adecuadamente con este aumento.
- Difícil de enfocar: a un gran aumento, las células bacterianas flotan dentro y fuera de foco, especialmente si la capa de agua entre el cubreobjetos y el portaobjetos es demasiado gruesa.
- Son transparentes: las bacterias mostrarán su color solo si están presentes en una colonia. Las celdas individuales presentes en la diapositiva son claras. La óptica regular de campo brillante solo mostrará las bacterias si se cierra el diafragma del iris del condensador. Esto se debe a la diferencia en el índice de refracción entre el agua y las células bacterianas.
- Difícil de reconocer: un ojo no entrenado puede tener problemas para diferenciar las bacterias del pequeño polvo y la suciedad que está presente en la diapositiva. Algunas bacterias también forman grupos y, por lo tanto, es difícil ver las células individuales.
Las organizaciones de investigación y los aficionados a los avances usan ópticas de contraste de fase para ver bacterias. Este sistema convierte las diferencias del índice de refracción de las bacterias en brillo. Las bacterias transparentes se pueden ver oscuras sobre fondo brillante. En el campo brillante, el cierre del diafragma del iris del condensador también hará que las bacterias parezcan más oscuras, pero al mismo tiempo también se introducen artefactos (“franjas”) alrededor de las células individuales. Una posibilidad es manchar las bacterias, pero en este caso el proceso de fijación y tinción puede introducir artefactos.
¿Cuál es una fuente segura de bacterias? Para fines recreativos o educativos, uno nunca debe usar alimentos en mal estado o (¡no lo permita!) Usar bacterias obtenidas del cuerpo humano y crecer en placas de agar. Los riesgos involucrados simplemente no valen la pena, especialmente cuando se trabaja con estudiantes. Otras fuentes, como el suelo o el humus tienen otras desventajas. Las impurezas dificultan la separación de las bacterias de otras partículas, especialmente si se utiliza una óptica de campo brillante. Más bien, recomiendo el uso de yogur. Debería ser posible ver celdas circulares pequeñas (cocos), que también pueden aparecer en pares. También es posible rascar algunas células bacterianas de ciertos tipos de queso. Brevibacterium se puede encontrar en queso Limburger, por ejemplo. Sin embargo, uno debe ser consciente de que algunos quesos usan una combinación de bacterias y hongos, y que las células fúngicas más grandes pueden superar a las bacterias.
En resumen, hay especímenes más fáciles de observar (y quizás también más interesantes) que las bacterias. Si desea ver celdas individuales, le recomiendo que empiece con suspensiones de levadura. Estas células eucariotas son mucho más grandes y pueden identificarse más fácilmente.
