La idea detrás de una técnica de recuento viable es determinar el número de células bacterianas presentes en un cultivo que están en un estado viable, es decir, capaces de crecer y reproducirse. Podemos hacer esto por tres métodos:
- Vierta el método de la placa
- Método de placa extendida
- Método de placa de racha
Los primeros dos métodos son las estrategias más utilizadas para obtener un recuento viable. En la incubación de las placas de medios, vemos colonias creciendo en la placa. El principio detrás de esto es que en el método de vertido en placa, cuando agregamos el cultivo directamente en el medio fundido caliente y lo agitamos bien, las células bacterianas agrupadas, si las hay, deben dispersarse de manera tal que cuando lo plaqueamos, cada colonia debería surgir de una sola célula bacteriana. De manera similar, en el método de la lámina extendida, lo ideal sería diseminar las células de manera tan agradable, rompiendo cualquier agrupación o grupo de bacterias presentes, de modo que cada colonia debe ser un clon de una sola célula. Solo entonces podremos evaluar el número de células viables originalmente presentes en nuestra muestra.
- Tomamos 1 ml de nuestra muestra para la placa de vertido y 0.1 ml para la técnica de placa de extensión.
- Debemos elegir 3 placas que nos den un recuento de colonias entre 3-300.
- Cuente el número de colonias en cada plato y tabule los datos. Si se trata del método de vertido en placa, entonces el recuento que obtenemos es por ml, mientras que para la lámina extendida es por cada 0.1 ml que se debe convertir a por ml.
- Multiplica cada conteo por el factor de dilución respectivo.
- Sume los tres conteos igualando el factor, digamos que todos se multiplican por un factor de 10 ^ 6.
- Encuentre el promedio que le da el no. De CFU / ml en la muestra original.
Déjame darte un ejemplo aquí
¡¡Espero que esto te ayude!!
