Ingeniería genética: ¿es posible inducir haploidía en un cultivo primario de fibroblastos humanos?

No estoy seguro de cómo este método será útil. Supongamos que obtiene su población de células haploides, ¿cómo sabrá cuál es cuál? Luego se llega al problema de clasificar las células por linaje parental (y eso supone que todos los cromosomas maternos / paternos se segreguen juntos en cada celda). Si secuencia el ADN extraído de su mezcla, no es realmente diferente de la secuenciación de las células diploides.


Sin embargo, para entretener tu idea original …

Las células haploides como los ovocitos se pueden generar a partir de fibroblastos a través de un intermedio de células madre pluripotentes inducidas [1].

La reprogramación de fibroblastos se puede lograr mediante la expresión de Oct3 / 4, Sox2, c-Myc y Klf4 que dará como resultado un iPSC [2].

Brevemente,

Aquí describimos un protocolo paso a paso para la generación de óvulos a partir de PSCs de ratón, tales como células madre embrionarias (ESC) y células madre pluripotentes inducidas (iPSCs). Las ESC e iPSC se inducen primero en células primordiales tipo células germinales (PGCLC) que a su vez se agregan con células somáticas de las gónadas embrionarias femeninas, los precursores de los ovarios adultos. La inducción de PGCLCs seguida de la agregación con las células somáticas toma hasta 8 d. Luego, las agregaciones se trasplantan debajo de la bolsa ovárica, en la cual los PGCLC crecen en vesículas de vesícula germinal (GV) ovocitos en ~1 mes. Los ovocitos GV derivados de PGCLC se pueden madurar en huevos en 1 d por maduración in vitro (IVM), y se pueden fertilizar con espermatozoides mediante fertilización in vitro (FIV) para obtener descendencia sana y fértil. Este método proporciona un primer paso hacia la reconstitución de todo el proceso de ovogénesis in vitro .

Advertencias a este método:

  • Se describe en ratones, no en humanos.
  • Las células haploides derivadas de oocitos habrán pasado por la meiosis y la recombinación genética. Esto se mueve alrededor de tus genes parentales.
  • Probablemente no funcionará en muestras masculinas. Aunque sería genial si lo hiciera.
  • Es bastante caro y no directo.

[1] http://www.nature.com/nprot/jour…
[2] Inducción de células madre pluripotentes a partir de cultivos de fibroblastos embrionarios y adultos de ratón mediante factores definidos