Negative Log base 10 de x, donde x es la potencia transmitida dividida por la potencia medida a lo largo de una ruta de referencia, donde la ruta de referencia se calibra para tener la transmisión como la ruta de la muestra en ausencia de muestra.
La razón por la que no se informa el espesor de la muestra es que las muestras en microbiología se colocan en forma líquida en una cubeta de un espesor estándar de 1 cm. Si la cubeta tiene un tamaño diferente, el instrumento escala automáticamente el resultado para que informe la densidad óptica que habría si la muestra tuviera un grosor de 1 cm.