La OD se mide en un fotómetro (espectral). El principio subyacente es que la mayor parte de la luz dispersada por las células ya no llega a la célula fotoeléctrica, por lo que la señal eléctrica es más débil que con una cubeta libre de células. El OD
de un cultivo bacteriano, por lo tanto, no es principalmente una absorbancia, como en el caso de un colorante disuelto. Las células de muchas bacterias son casi incoloras y la absorción de luz real es marginal. Por lo tanto, no es correcto (aunque desafortunadamente común) designar la OD de una cultura y su absorción; el término más apropiado sería turbidez. Solo las células fuertemente pigmentadas, como las bacterias fotótrofas (violeta y verde), causan una absorción de luz significativa además de la dispersión. Uno debe saber que la célula fotoeléctrica no “sabe” qué causa la disminución en la intensidad de la luz. Simplemente nota “menos luz” que se muestra como un número, generalmente como valor de extinción. Pero incluso si la pantalla tiene la etiqueta “absorción”, sabrá que está lidiando con la turbidez.
OD600 es preferible a la espectroscopia UV cuando se mide el crecimiento a lo largo del tiempo de una población de células porque a esta longitud de onda, las células no se matarán como lo harían con demasiada luz UV. También se ha demostrado que la luz UV causa mutaciones de pequeño a mediano tamaño en el potencial de las bacterias que alteran o destruyen los genes de interés.
Gracias a Naga Chaitanya Kavuri
