Adeno Associated Virus (AAV) ha sido elegido por varias razones como un popular vector de terapia génica, aunque estoy de acuerdo en que es curioso que el campo y muchas compañías se hayan enfocado intensamente en él.
Como algunos antecedentes rápidos, AAV normalmente se replica en el cuerpo humano en presencia de un virus auxiliar (por ejemplo, adenovirus, virus del herpes simple) que proporciona funciones auxiliares para ayudar a la replicación.
Por qué AAV es útil:
1. El virus sin envoltura ayuda con la fabricación, ya que es estable y se concentra fácilmente en columnas de gradiente. El virus también puede ser liofilizado. Debido a que es solo un caparazón de proteína con ADNss dentro, no lleva a ninguno de los componentes de la célula huésped mejorar la seguridad.
2. Capacidad para ser producido en células de insectos para la fabricación. Para la producción viral industrial, las células se cultivan idealmente en suspensión. Las células humanas son más caras para este propósito y tienen el riesgo de propagar otros patógenos dentro de la incubadora que requieren rigurosas pruebas de QA / QC. Por el contrario, las células de insectos son más baratas, y con el uso del sistema de baculovirus, se transducirá el 100% de las células. Además, los patógenos que infectan las células de invertebrados no presentan riesgos para los humanos si están presentes.
3. El AAV recombinante permanecerá en realidad episomal dentro de la célula, que es una característica de seguridad para la terapia génica, pero también una limitación en otros casos donde la expresión puede perderse con el tiempo. WT AAV puede integrarse a través de las proteínas Rep en el cromosoma 19, pero el AAV para la terapia génica no tiene gutles ni proteínas virales y, por lo tanto, permanece episomal.
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4. El tamaño del paquete de 4.8 kb es utilizable para la mayoría de las aplicaciones de terapia génica. Además, solo se necesitan los ITR en ambos extremos, lo que permite que solo se usen secuencias de interés.
5. El AAV puede fabricarse con bastante facilidad en un laboratorio mediante la transfección transitoria de células 293, y las columnas comerciales están disponibles para la purificación. Esto permite que las ideas se piloteen rápidamente y luego se inserten en el proceso de flujo industrial. Los investigadores también han eliminado los pasos de co-transducción de adenovirus, simplificando el proceso de producción y agregando otro nivel de seguridad.
6. Eficiencia que transduce los tipos de células que se dividen y que no se dividen, y el rango de serotipos disponibles, algunos de los cuales son más eficientes en los tejidos que otros, permitiendo a los investigadores adaptar mejor sus terapias.
7. La baja inmunogenicidad de AAV permite una expresión génica bastante estable. AAV es relativamente silencioso a diferencia de los adenovirus en el desencadenamiento de los TLR tras la entrada del virus. La única reacción observada en pacientes es la respuesta ocasional de CTL contra las proteínas de la cápsida de AAV que permanecen después de la transducción inicial. Los anticuerpos están presentes en la población humana, sin embargo, y suponen un desafío al seleccionar un vector. Los investigadores están presionando por nuevos serotipos de AAV con menos anticuerpos preexistentes.
8. Amplia gama de publicaciones que informan cómo el vector puede ser manipulado y utilizado. En pocas palabras, los otros sistemas existentes son practicados por unos pocos laboratorios debido a las dificultades y, por lo tanto, como cualquier otro producto, las tecnologías fáciles serán más ampliamente adoptadas.
