Supongo que te diré lo básico y luego puedes modificar desde allí.
El buffer de caballo de batalla para las grabaciones eléctricas de células enteras de TEVC (al menos para los canales de K + ya que las mencionas específicamente) es ND96. Contiene NaCl 96 mM, KCl 2 mM, CaCl2 1,8 mM, MgCl2 1 mM y HEPES 5-10 mM, pH 7,4. HEPES se puede reemplazar con otro componente de memoria intermedia si es necesario. Por ejemplo, el hierro se cae de HEPES pero no de ADA. Las concentraciones de los amortiguadores hacen un buen trabajo al recapitular lo que una célula experimentaría (alto contenido de sodio en el exterior, alto contenido de potasio en el interior).
Para estudiar la cinética del cierre de canales, hay un par de trucos que puedes usar. El primero es simplemente ajustar las concentraciones de NaCl y KCl. Por ejemplo, cuando se estudian los canales K + de KCNQ, el aumento del KCl en cualquier lugar, desde 10 mM hasta 98 mM, le dará grandes corrientes de cola durante los potenciales de hiperpolarización. Dado que los iones fluyen hacia abajo en sus gradientes de concentración, una alta concentración externa de K + dará lugar a una afluencia de iones al cerrarse. Una alternativa al alto K + externo es reemplazar el KCl con RbCl o CsCl. Estos iones no están presentes dentro de la célula, pero pueden pasar a través de la mayoría, si no de todos, los canales de K +. De esta forma puede monitorear la cinética de apertura del canal con despolarizaciones (K + fluirá) y el cierre del canal con la hiperpolarización (Rb + o Cs + fluirán). Este truco es particularmente útil si está tratando de separar los mecanismos que afectan la vía de conducción iónica del canal.
El tampón variará ampliamente para las células de mamíferos (fijación de parches). Esto se debe al tipo de grabación (célula completa, dentro-fuera, etc.) y al tipo de célula (células CHO, cardiomiocitos, neuronas, etc.). Y necesita usar dos: una solución interna y una solución externa. Para estos tipos de experimentos, existe un requisito de osmolaridad y, a menudo, la glucosa es lo que se usa. Pero similar a los experimentos de TEVC, necesitarás un agente tamponador y un equilibrio de sal.
Para las grabaciones de parches de células enteras, muchos laboratorios realmente hacen parches perforados. En esta modificación, la solución del electrodo contendrá una pequeña cantidad de un reactivo antibiótico o antifúngico que causa pequeños agujeros en la membrana.
No tengo ninguna experiencia personal trabajando con configuraciones de corte abierto o de adentro hacia afuera y no me siento cómodo comentando los buffers utilizados tradicionalmente en esos sistemas.
