¿Por qué un clon infeccioso es tan importante en virología? ¿No podemos hacer la manipulación del genoma en el cultivo celular del genoma viral extraído?

Creo que te estás refiriendo a un plásmido icDNA de un virus ARN. Si es así, la respuesta es que la manipulación genética de un plásmido icDNA que codifica el virus ARN es mucho, mucho más fácil que intentar manipular el genoma de ARN de un virus ARN en su estado de ARN. El ARN es mucho más frágil que un plásmido de ADN bicatenario estable. También existen múltiples técnicas diseñadas para manipular fácilmente el ADN mediante mutagénesis por PCR o ordenamiento simple de secuencias de ADN de empresas biotecnológicas y luego inserción con enzimas de restricción en el plásmido icDNA. También existen técnicas más nuevas como crispr entre otras que pueden usarse para alterar un plásmido icDNA. Por lo que sé, la manipulación genética de los genomas víricos de ARN en su estado de ARN no está establecida o es muy difícil / costosa y no es práctica. Además, un solo clon de ADNc una vez manipulado y secuenciado puede seleccionarse fácilmente y luego clonarse / replicarse en bacterias competentes. Esto asegura que la secuencia de los plásmidos icDNA que transfectos sea idéntica y, por lo tanto, disminuye las posibilidades de error. Luego, el plásmido icDNA se extrae de las bacterias y se usa para la transfección en células eucariotas para producir el virus viable completo con el genoma recientemente manipulado.