Cómo hacer cultivos de bacterias

Mientras que Sarah Khan mencionó cómo hacer dos tipos de culturas comunes en un entorno de laboratorio, esta pregunta también es muy amplia cuando se pasa a los detalles.

Varias, si no la mayoría, de las bacterias no pueden crecer solas sin microorganismos vecinos específicos, y / o requieren superficies muy específicas y condiciones de nutrientes para crecer. Lo que cultivamos en los laboratorios de todo el mundo es en el 99% de los casos de lo que alguna persona hace 50-150 años logró obtener culturas puras. El grueso de los microorganismos en la naturaleza es simplemente demasiado difícil de cultivar adecuadamente en el laboratorio con nuestras técnicas estandarizadas.

Entonces, antes que nada, debes definir lo básico:

  1. ¿Qué quieres hacer con tus cultivos bacterianos?
  2. ¿Necesita una cultura pura o una cultura mixta para este propósito?

Daré un ejemplo para E. coli, un organismo modelo común utilizado para la utilidad y la investigación en la mayoría de los laboratorios de biología celular o microbiológicos.

Para muchos trabajos rutinarios de E. coli en un laboratorio microbiológico, a menudo desea cultivar su E. coli en cultivo líquido si desea obtener una gran cantidad de células en una determinada fase del ciclo de crecimiento. Esto se debe principalmente a que el crecimiento en medios sólidos es más lento y desigual debido a la falta de mezcla de los medios y los diversos efectos de la formación de colonias.

A menudo creces tus células de E. coli en placas de medios sólidos cuando quieres encontrar células con antecedentes genéticos específicos, ya que a menudo deseas trabajar con bacterias genéticamente similares como sea posible, y el crecimiento en líquido generalmente evita la clasificación adecuada de clones genéticos como los medios de crecimiento son mixtos.

Si solo quieres un “cultivo bacteriano” puedes dejar un vaso de leche al sol durante unas horas y llamarlo un día, las diversas bacterias en la leche y en el aire comenzarían a multiplicarse rápidamente en el calor y tú obtendría leche agria, que es una cultura bacteriana.

Las culturas bacterianas no se hacen, si puedes permitir que te corrija, sino que las bacterias se cultivan. Esa es la forma correcta de expresarlo.

Para cultivar bacterias, debes conocer los principios básicos de la microbiología. Definitivamente, uno tiene que optar por una cultura pura que contenga un solo tipo de bacteria para empezar. Para obtener un cultivo puro, debe inocular la fuente (como tierra, agua o simplemente exponer al aire) en el medio líquido estéril especialmente diseñado para obtener las bacterias que le interesan. Este medio lo suministrará con nutrientes combinados con la incubación a una temperatura óptima. Este medio líquido puede contener más de un tipo de bacteria, por lo que para obtener ese cultivo puro se tiene que rastrear un asa del caldo cultivado sobre una placa de agar sólido. Cada colonia bien aislada en la placa de agar se llama cultivo puro. Esto puede rayarse adicionalmente en un agar inclinado y refrigerado para preservar el cultivo puro.

Esta cultura pura se puede usar aún más de vez en cuando. Mantener las culturas puras es una rutina para los microbiólogos y los investigadores en general, ya que ahorra tiempo para comenzar de nuevo.

Hay dos maneras de hacer crecer un cultivo bacteriano en una placa de agar solidificada o en un caldo líquido. Para ambos métodos, se prepara un medio nutriente bacteriano que contiene todos los componentes necesarios requeridos para el crecimiento y se esteriliza en autoclave a 121 grados Celsius durante 15 minutos para esterilizar. Luego se agrega un pequeño inóculo (muestra bacteriana) al medio y se incuba a 37 grados Celsius durante 24 horas para el crecimiento bacteriano.