¿Por qué una célula competente tiene menos eficiencia?

si se habla de eficiencia de transformación, que es la capacidad de las células competentes para absorber el ADN extraño, hay muchos factores que pueden alterar la eficiencia de la transformación.

Tamaño del plásmido : la eficacia de la transformación disminuye linealmente al aumentar el tamaño del plásmido, es decir, los plásmidos más grandes se transforman menos bien que los plásmidos más pequeños.

Las formas de DNA – El plásmido Supercoiled tiene una eficacia de transformación ligeramente mejor que los plásmidos relajados – los plásmidos relajados se transforman con una eficacia de alrededor del 75% de los superenrollados.

Sin embargo, el ADN lineal y monocatenario tiene una eficacia de transformación mucho menor. Los ADN monocatenarios se transforman con una eficacia 10 veces menor que los de doble cadena.

Métodos de transformación : el método de preparación de células competentes, la duración del choque térmico, la temperatura del choque térmico, el tiempo de incubación después del choque térmico, el medio de crecimiento utilizado y diversos aditivos, pueden afectar la eficiencia de transformación de las células. La presencia de contaminantes y ligasa en una mezcla de ligación puede reducir la eficiencia de transformación en la electroporación. El método de electroporación en general tiene una mejor eficiencia de transformación que los métodos químicos.