¿Es necesaria la safranina para la tinción de Gram? Si es así, ¿por qué?

El objetivo de la tinción de Gram es diferenciar entre dos tipos de bacterias basadas en la composición bacteriana de la pared celular.
Las bacterias Gram positivas que tienen más peptidoglicano y menos lipopolisacárido se tiñen de color púrpura (violeta cristal).
Por otro lado, las bacterias Gram negativas que tienen más lipopolisacáridos fuera de la capa de peptidoglicano pierden cristal violeta después de la etapa de decoloración de la tinción de Gram. Por lo tanto, toman el color de la mancha secundaria añadida después del paso de descolonización.
En el método convencional de tinción de Gram, la tinción secundaria utilizada es Saffranin. El propósito de la tinción secundaria es dar contraste para que los dos tipos se diferencien.
En lugar de Saffranin, se puede usar cualquier otra mancha básica que no sea cualquier mancha de color púrpura. Ejemplos Fucsina básica, verde malaquita.