¿Cómo se contaminan las líneas celulares con mycoplasma?

Las líneas celulares se contaminan con micoplasma … porque los humanos.

Aunque Mycoplasma – Wikipedia (“hongos formados”) pertenece a la clase bacteriana Mollicutes, la contaminación por micoplasmas es cualquier cosa menos “linda”: el micoplasma supera a las células cultivadas por nutrientes, altera la fisiología celular y deja sin efecto los resultados experimentales y arruina el presente y el futuro proyectos de investigación científica mediante la difusión / contaminación cruzada de nuevos cultivos celulares.

Solía ​​hablar conmigo mismo (y de vez en cuando los fibroblastos que estaba cultivando) mientras trabajaba en la campana de flujo laminar. Adivina cuál es la principal fuente de contaminación por micoplasma. Mycoplasma orale, de la boca humana. ¡Aparentemente no debería “hablar, silbar o cantar en un banco limpio” de acuerdo con Out, Damned Mycoplasma!

Idealmente, las líneas celulares deberían obtenerse de fuentes acreditadas como American Type Culture Collection (ATCC), pero en realidad, no todas las líneas celulares pueden obtenerse de ATCC y no todos los laboratorios pueden permitirse comprar cada nueva línea celular que necesiten los investigadores. Por lo tanto, los investigadores suelen compartir e intercambiar líneas celulares. Compartir e intercambiar líneas celulares hace que cada laboratorio sea vulnerable a la contaminación por micoplasmas que se origina de cualquiera de los muchos humanos que han manejado directamente o indirectamente el acceso al cultivo celular (por ejemplo, acercándose al cultivo celular o tocando a cualquier persona que maneje el cultivo celular) .

Mi primer proyecto en la industria farmacéutica fue como pasante de verano investigando diferentes métodos de detección de micoplasmas. Para mi proyecto en particular, el ensayo de infección por micoplasma basado en PCR fue el más sensible. Aquí hay un ensayo comercial que detecta la contaminación por Mycoplasma de cultivos celulares (esto no fue lo que yo usé).

Dado que estaba trabajando en un entorno donde:

• Se están desarrollando ensayos para medicamentos contra el cáncer destinados a los humanos
• Equipos de cultivo celular de última generación / salas de cultivo de tejidos
• Los reactivos se pueden comprar contra hechos

Uno supondría que la contaminación por micoplasma sería rara. Este no era el caso. He tratado no solo con micoplasmas sino también con la contaminación por hongos de mis líneas celulares, y las fuentes de estos se deben a que los humanos (principalmente a mí) manejamos el cultivo celular y no ejercemos la precaución adecuada. Como resultado tuve que descartar semanas de trabajo y me retrasé al menos 2 semanas para comenzar un nuevo lote de células, sin mencionar el riesgo de contaminación de los matraces de cultivo celular de otros investigadores en las mismas incubadoras.