¿Qué estás tratando de hacer con la proteína? ¿Estás tratando de purificarlo? Creo que la forma más fácil de hacerlo es expresar la proteína en una bacteria diferente. También podrías expresarlo en levadura y purificarlo desde allí. Si está tratando de realizar estudios funcionales sobre la proteína, su mejor opción es usar un sistema diferente. Si desea comprender el efecto de toxicidad en E. coli, puede usar un sistema inducible y determinar el nivel relativo de proteína a la que la proteína es tóxica y qué vía se utiliza. Hay muchas formas diferentes de abordar este problema. Simplemente no sé cuál es tu objetivo final para guiarte en la dirección correcta.
Si una proteína es tóxica en células de E. coli, y la expresión en una gran cantidad da como resultado la muerte celular, ¿hay alguna manera de expresar la proteína en E. coli?
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Dos posibles enfoques:
- Si hay algún antídoto para la proteína (p. Ej., Es tóxico debido a su actividad enzimática, pero hay un inhibidor de la enzima) podría intentar expresar la proteína en presencia del inhibidor.
- Podría intentar expresar una pro-proteína que no sea tóxica pero que se pueda convertir fácilmente en la proteína funcional. Cf. la forma en que las proteasas se expresan típicamente como proenzimas para evitar que mastiquen prematuramente las proteínas celulares.
Si la proteína es leth en grandes cantidades, la única forma no letal de expresarla sería expresarla en pequeñas cantidades.
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