¿Cómo aislamos los glóbulos blancos de la sangre completa?

Para aislar los glóbulos blancos (glóbulos blancos) de la sangre entera usando Ficoll Histopaque, siga estos pasos:

1. Retire los medios adecuados (como, RPMI 1640) y la solución de histopaque de la nevera y déjelos calentar a temperatura ambiente. El Flecing se debe realizar en un cultivo tisular adecuado.
2. Después de etiquetar los tubos (tapas) con el número de muestra (o ID), transfiera la sangre a un tubo de 50 ml (halcón).
3. Agregue 15 ml de Histopaque en un tubo halcón usando una pipeta, lentamente coloque sangre (hasta 30 ml) sobre el histopaque (no mezcle sangre e histopaco).
4. A continuación, centrifugue la muestra sin aceleración ni desaceleración a 400 g durante 30 minutos a 20 ° C.
5. Recoja la capa de glóbulos blancos (capa leucocitaria) en un nuevo tubo halcón de 50 ml con una pipeta adecuada, luego centrifugue la muestra a 200 g durante aproximadamente 10 min.
6. Finalmente, descarte el sobrenadante y resuspenda el sedimento celular con los medios adecuados, dependiendo de su tamaño (posiblemente en 10-50 ml) y cuente las células.

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