Parece que algo en la transformación salió mal. Si tiene bacterias que ya expresan el gen de resistencia a la ampicilina, trate de cultivarlas en su plato (si crecen, la placa está bien), ya que supongo que tiene múltiples placas del mismo lote de agar. También debe incluir un plásmido diferente con resistencia a la ampicilina que sepa que funciona al 100% cuando se transforma, ya que necesita un control positivo. Si tiene algunas placas libres de antibióticos, puede ver si la bacteria es viable después de la transformación mediante el recubrimiento de una cantidad muy pequeña (incluso algo como 1 ul está bien). También debe verificar dos veces la secuencia / mapa del plásmido para asegurarse de que no haya nada más que pueda interferir con la bacteria.
Deberías intentarlo de nuevo, a veces sucede una mierda. Verifique dos veces el procedimiento de transformación y asegúrese de que todas las temperaturas y horas sean las correctas. El paso de choque térmico es absolutamente crítico. Si no lo hace, también debe cultivar la bacteria en algo así como medio SOC durante 30-60 minutos a 37 grados antes de la siembra.
